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酶標儀使用方法

點擊次數:3285  發布時間:2017-07-28
 酶標儀使用方法
    
作為微孔板比色計的酶標儀,其基本功能不外乎一個比色測定,所不同的是在測定波長范圍、吸光度范圍、光學系統、檢測速度、震板功能、溫度控制、定性和定量測定軟件功能等方面的差異,當然全自動酶免疫分析系統還具有自動洗板、溫育、加樣等功能。在臨床實驗室實際工作中,實驗人員在使用酶標儀進行測定操作時,有時難免會對酶標儀的一些性能指標產生迷惑,甚對酶標儀的應用產生錯誤的理解。如諸如使用酶標儀較用肉眼觀察測定的陽性率明顯增加這樣的問題。
一、測定波長目前國內常見的ELISA試劑盒所使用的標記用酶均為辣根過氧化物酶(HRP),底物通常為四甲基聯苯胺(TMB)和鄰苯二胺(OPD),其在過氧化氫溶液的存在下,經HRP作用,分別氧化為2,2,-二氨基偶氮苯(DAB)和聯苯醌。。除了這兩個基本濾光片外,考慮到雙波長比色的需要,還應有620nm或630nm或650nm和405nm波長的濾光片,其他濾光片可根據自己的需要選擇。有時,有的實驗室希望用酶標儀作微量生化測定,故酶標儀生產廠家對其生產的 酶標儀擴展了紫外檢測功能,此時需要一個340nm波長濾光片。
二、測定的吸光度范圍通常,酶標儀的吸光度測定范圍在。對于酶標儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍,主要要看在一定的吸光度范圍內的線性和精密度如何。
三、光學系統酶標儀的光學系統采用的是垂直光路多通道(通常為8或12通道,亦有單通道)檢測,一般為硅光管或光導纖維,除測定通道外,有的酶標儀還有一個參比通道,每次測定可進行自我校準。 酶標儀的光學系統功能如何,均可通過酶標儀測定的吸光度范圍、線性度、精密度和準確度等體現出來。光學系統好的話,則上述指標也應較佳。測定的精密度與測定通道之間的均一性有直接關系。單通道可避免因通道不同所致的差異。
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